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1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl!
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min!
6洗板,同4!
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4!
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min!
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對照n的 od值后,計(jì)算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
雞-檢測試劑盒我們將以高度的責(zé)任感和-的產(chǎn)品為客戶提供-的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、-競爭力的價格,所有這些-了我們向您提供的質(zhì)的服務(wù)。江萊生物現(xiàn)貨優(yōu)惠***,所有elisa試劑盒均以-折扣價讓利客戶,全程免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo),提供免費(fèi)代測服務(wù),歡迎新老客戶來電咨詢詳情。
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上海交通大學(xué) ,
湘潭大學(xué)-彭
天津中大學(xué)-于
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院-郭
武漢大學(xué)-徐
西安交通大學(xué)
陜西西安西北大學(xué)
甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)-黃
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天津科技大學(xué)-趙