層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外,直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞,一般不超過(guò)1米。分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,陰陽(yáng)樹(shù)脂柱多少錢,如果支掌濾板下的死體積大,陰陽(yáng)樹(shù)脂柱供應(yīng),被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辯力。在分離時(shí),死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000。
如遇停運(yùn)期間恰為冬季或環(huán)境溫度較低,為了防止樹(shù)脂儲(chǔ)存期間---,對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行充分再生處理與水洗后,應(yīng)用鹽水進(jìn)行過(guò)柱浸泡,對(duì)樹(shù)脂床層與樹(shù)脂內(nèi)部進(jìn)行鹽水置換保存,后期恢復(fù)運(yùn)行之前,再用潔凈的去離子水進(jìn)行清洗置換。
鹽水或堿鹽水浸泡防止染菌
樹(shù)脂長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在樹(shù)脂柱中存在藻類、---等微生物滋生的風(fēng)險(xiǎn),為了有效抑制該問(wèn)題的發(fā)生,可對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行充分再生與清洗使樹(shù)脂保持清潔狀態(tài)后,用10%的nacl鹽水或10%的nacl + 2%的naoh堿鹽水過(guò)柱浸泡置換處理后,陰陽(yáng)樹(shù)脂柱生產(chǎn)商,將樹(shù)脂保存在相應(yīng)的鹽水或堿鹽水中,可有效---。
層析柱進(jìn)氣泡怎么辦?
空氣進(jìn)入,如緩沖液走空,連接進(jìn)入系統(tǒng)過(guò)程中
用純水反向沖洗,北京陰陽(yáng)樹(shù)脂柱,如果有柱位閥可直接切換流向,沒(méi)有的話可將柱子反接
對(duì)于大多數(shù)層析柱來(lái)說(shuō)可用---沖洗,以提高排氣效率
緩沖液中有氣泡
上柱前將緩沖液脫氣
在緩沖液入口使用空氣感應(yīng)器
溫度影響,如在冷室操作后馬上在室溫操作,或低溫緩沖液直接在室溫使用
緩沖液在使用前達(dá)到熱平衡