上樣
1、干法上樣
、制樣:將物料用極性較大的且洗脫劑中需用的溶劑溶解成漿狀或溶液狀,再加入硅藻土或硅膠充分混合,晾干;再粉碎成粉未狀,混合均勻。
、將制好的樣品,置于預柱中或層析柱上端硅膠床層的上面,鋪平;再放上濾布網,篩板,再按圖裝好柱上端封頭。
2、 濕法上樣
、制樣:將物料用極性比硅膠小的溶劑例如:、----混合液、、等溶解或制成漿狀,直接倒在層析柱硅膠床層的上面,鋪平即可如果上樣液多,也可以用泵或氮氣慢慢打壓入柱中。
、同上,放上濾布網篩板,裝好上封頭。
影響大孔吸附樹脂吸附性能的主要因素 大孔吸附樹脂的分離效果受溶液的ph值、吸附質的極性、分子大小、樹脂柱的清洗和洗脫液的種類等因素制約,同時也與外界的溫度和壓強有關。影響其吸附性能的主要因素如下:(1)大孔吸附樹脂的比表面積越大,一般吸附性能越好,吸附量越多。(2)大孔吸附樹脂的孔徑越大,吸附質分子在孔內的擴散速度也越大,有利于達到吸附平衡。經驗表明,當吸附劑孔徑與吸附質分子的直徑比為6∶ 1左右時,吸附性能。(3)隨著孔容的增加,大孔吸附樹脂的吸附量增加。(4)大孔吸附樹脂孔徑的大小,直接影響不同大小分子的自由進入,從而使樹脂吸附具有選擇性。只有當孔徑對于被吸附組分足夠大時,比表面積才能充分發揮作用,且大孔吸附樹脂的孔徑分布越窄,吸附性能越好。(5)極性樹脂較易吸附極性物質,非極性樹脂較易吸附非極性物質。(6)若大孔吸附樹脂上的功能基團與吸附質分子之間可以形成氫鍵或電子轉移絡合物,則有較強的吸附作用。(7)大孔吸附樹脂的吸附一般都是放熱過程,大孔樹脂柱供應,溫度升高,吸附量將減少。(8)壓強是影響大孔吸附樹脂吸附的因素之一,壓強越大,大孔樹脂柱廠家,吸附量越多,大孔樹脂柱,而吸附速率也隨著壓強的增大而增大。(9)當溶液中存在兩種以上溶質時,往往會引起一種溶質易吸附而另一種溶質的吸附量降低,大孔樹脂柱生產商,一般來講,對混合溶質的吸附較純溶質的吸附效果差。(10)其中大孔吸附樹脂豐富的微孔結構也是影響吸附量的重要因素
硅膠柱層析和大孔樹脂柱層析的區別?
大孔吸附樹脂是一類不含交換基團且有大孔結構的高分子吸附樹脂,具有---的大孔網狀結構和較大的比表面積,可以通過物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機物即非極性或極性較弱的物質,具有物理化學穩定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長、宜于構成閉路循環、節省費用等諸多優點.樹脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質) 之間的范德華引力,通過它---的比表面進行物理吸附而工作,使有機化合物根據有吸附力及其分子量大小可以經一定溶劑洗脫分開而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的.
硅膠柱的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離,一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附,極性較弱的物質不易被硅膠吸附,整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程.其中有微孔,對不同化合物的吸附能力不同,然后選用適當的洗脫劑進行洗脫從而達到分離.