4. 各種細胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些，－2~－3℃/ 分鐘合適；胚胎細胞耐受性較小，不宜太快�？傊谝婚_始時，下降速度不能超過－10℃/ 分鐘。
5. 用什么防護劑合適和用量多大，要依細胞而定，初代培養細胞用 dmso 較好，細胞生物學實驗，一般細胞可用甘油；用量以較小為好。有人認為膚上皮細胞貯存在 20%-30% 甘油中---。
6. 原則上細胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應再復蘇培養一次，然后再繼續凍存。
7. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，雅安細胞，以免
8. 注意自身的安全，對于來自人源性或---的細胞株應---小心。操作過程中，應避免引起氣溶膠的產生，小心有毒性試劑例如 dmso，并避免尖銳物品-等。
細胞培養中常見的污染及解決方法
---污染
---污染后，培養基一般清澈，保持原色。細絲可以在顯微鏡下觀察到。，一些---類似于---碎片，但其中許多清晰可見，看起來像珊瑚，比較容易區分。此外，它們會慢慢長出細細的黑色細絲，因為它們生長得比較慢，不像---那樣容易被發現，一旦發現培養基被污染，它們將很難存活。
解決方法：一旦被---污染，果斷丟棄，然后對細胞房、co2 培養箱、器皿和培養基進行消毒。
3d細胞培養
3d多細胞腫liu球是在體外應用組織培養方法使腫liu細胞以多細胞集聚體的形式生長成為具有三維結構的球體。與傳統的2d貼壁細胞培養模型相比，3d多細胞腫liu球可以通過模擬三維細胞網絡、細胞與基質、細胞與細胞之間的相互作用，從而貼近腫liu組織中相應的病理生理特征。因此，單細胞測序， 3d多細胞腫liu球培養模型已經逐漸應用于gan細胞培養和分化、ai癥研究、yao物和毒性篩選及組織工程等特定應用中。雖然3d多細胞腫liu球模型具有更---的實體腫liu生理相關性，但是與2d貼壁細胞培養模型相比，獲得大量相對統一的3d多細胞腫liu球模型需要-系列的培養過程和表征手段。
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