該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的定量是比較精que的，但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖-酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0．2%影響測(cè)定結(jié)果。如tritonx-100、sds、np-40等。
1．bradford濃染液的配制：將100mg考馬斯亮藍(lán)g-250溶于50ml 95%-，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸餾水補(bǔ)充至1000ml，此染液放4℃至少6個(gè)月保持穩(wěn)定。
2．標(biāo)準(zhǔn)曲線蛋白質(zhì)樣本的準(zhǔn)備：盡量使用與待測(cè)樣本性質(zhì)相近的蛋白質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)品，例如測(cè)定抗ti，可用純化的抗ti作為標(biāo)準(zhǔn)。如果待測(cè)樣本是未知的，也可用抗ti作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之間繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3．將待測(cè)樣本溶于緩沖溶液中，該緩沖溶液應(yīng)與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的緩沖溶液相同(hao用pbs)。
4．按1：5用蒸餾水稀釋濃染料結(jié)合溶液，如出現(xiàn)沉淀，過濾除去。
5．每個(gè)樣本加5ml稀釋的染料結(jié)合溶液，作用5～30min。染液與蛋白質(zhì)結(jié)合后，將由紅色變?yōu)樗{(lán)色，在595nm波長下測(cè)定其吸光度。注意，顯色反應(yīng)不得超過30min．
6．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣本的濃度。
生產(chǎn)方法 由鄰磺酸-jia醛與a-n-乙ji--間甲ben磺酸在酸性介質(zhì)中縮合成隱色體。再經(jīng)-suan鈉或-氧化得到色素，中和后用-鈉鹽析，再精制而得。山東富舜新材料科技有限公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。生產(chǎn)中，縮合反應(yīng)一般需幾十小時(shí)，山西亮藍(lán)染料，如用-加尿素作為縮合劑，反應(yīng)時(shí)間比僅用-為縮合物時(shí)可減少約1/5。
生產(chǎn)方法 亮藍(lán)的制備
由鄰磺基-jia醛與n-乙ji-n-(3-磺基-)--an縮合，再經(jīng)-suan鈉或-氧化，反應(yīng)結(jié)束后用純堿堿化，再用-進(jìn)行鹽析得粗品。將粗品溶于水，再用-鹽析即得成品。亮藍(lán)鋁色淀的制備
由氯化鋁、硫酸鋁等的鋁鹽與碳酸鈉等的堿類制取-，然后添加于亮藍(lán)水溶液，沉淀而得產(chǎn)品。
生產(chǎn)方法 1亮藍(lán)制備。由鄰磺基-jia醛與n-乙ji-n-3-磺---an縮合，再經(jīng)-suan鈉或二氧化鋁氧化，反應(yīng)結(jié)束后用純堿堿化，再用-進(jìn)行鹽析得粗品。將粗品溶于水，植物亮藍(lán)染料，再用-鹽析即得成品。
(2)亮藍(lán)鋁色淀制備。由氯化鋁、硫酸鋁等鋁鹽與碳酸鈉等堿類制取-，然后添加于亮藍(lán)水溶液，沉淀而得產(chǎn)品。
生產(chǎn)方法 由-醛磺酸與α-n-乙ben-)間甲ben磺酸的縮合物用-suan鈉或-氧化成色素，中和后用-鈉鹽析，再經(jīng)精制而得。可轉(zhuǎn)化為鋁色淀。
亮藍(lán)，又名食用藍(lán)色1號(hào)日本、食用藍(lán)色2號(hào)，屬水溶性非-類著色劑。分子式c37h34n2na2o9s3，食用染料亮藍(lán)，相對(duì)分子792.86。亮藍(lán)為食用藍(lán)-素，屬于人工合成色素，是由-jia醛鄰磺酸與n-乙ji-n- (3-磺基-)--an經(jīng)縮合、氧化而制得的。屬于-類化合物。高濃度的tris、edta、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、-銨和去污劑時(shí)測(cè)定有干擾。可在食品、-、化妝品等行業(yè)中作著色劑用。食品行業(yè)中適用于糕點(diǎn)、糖果、飲料等的著色。
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