西安博源宏達(dá)自動(dòng)化設(shè)備有限公司為您提供sigma試劑血清代理。sigma試劑血清
人ab血清中缺少抗a、b血型抗原的抗體，常用于使免疫反應(yīng)降到---。已經(jīng)證實(shí)，人ab血清可以提高多數(shù)人來源細(xì)胞生長速率，并且使用濃度比混合型血清---。更適用于細(xì)胞、組織---培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制。
1、血清來源：可從---各地收集胎牛血清，但必須符合其標(biāo)準(zhǔn)和美國農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求。
2、血清的收集：必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)，低溫采集，一次分離，分離后立即混合凍存。
3、血清的制備：---igg胎牛血清、透析血清、γ-射線輻照；
4、---過濾：0.22μm和0.1μm濾膜過濾；
5、成品分裝：根據(jù)需要分裝成不同規(guī)格。
五、牛血清的使用所產(chǎn)生的常見問題
一由于血清營養(yǎng)豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過程中容易產(chǎn)生以下問題：
1、改變培養(yǎng)液的ph值
牛血清的ph理論值為7.0～8.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的碳---鈉后即達(dá)到細(xì)胞生長所需要的滲透壓，再加入10％的牛血清，一般會(huì)使培養(yǎng)液的ph值發(fā)生改變。因此在使用過程中應(yīng)注意ph的變化，如有---可用1mol/lnaoh或1mol/lhcl調(diào)ph到所需值。
2、由于血清的營養(yǎng)成分豐富，非常適合---、---和支原體等生長。國產(chǎn)血清大部分采用手工分裝，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)，將會(huì)把污染物帶入正在培養(yǎng)的細(xì)胞中，而使得細(xì)胞不能正常生長。
3、血清在貯存解凍過程中會(huì)產(chǎn)生沉淀，這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質(zhì)，在-15℃冷凍保存解凍后就會(huì)自然形成沉淀，隨著保存時(shí)間的延長，沉淀量會(huì)增加。因此在融化血清時(shí)一般應(yīng)先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清完全融化，以避免沉淀的增加。添加血清時(shí)應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會(huì)使得所培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量黑點(diǎn)，或者細(xì)胞表面將會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì)，影響細(xì)胞的正常生長。為減少血清的損失，可以把有沉淀的血清收集起來進(jìn)行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾。
二-細(xì)胞培養(yǎng)中牛血清對(duì)細(xì)胞及---滴度的影響
血清是一種成分復(fù)雜的混合物，不同批次血清對(duì)細(xì)胞生長的促進(jìn)作用不同。-細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及---滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
1、細(xì)胞生長速度緩慢，長滿單層時(shí)間長；從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10％的對(duì)照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時(shí)，會(huì)出現(xiàn)對(duì)照血清長滿單層，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來-培養(yǎng)細(xì)胞。
2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常，細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化；由于血清的問題，使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會(huì)變差；比如：細(xì)胞瓶里會(huì)出現(xiàn)一些---的小黑點(diǎn)并非污染，或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物；細(xì)胞的輪廓變得模糊，細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充，從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長。
3、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象，不能連續(xù)傳代；較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子，會(huì)使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細(xì)胞會(huì)從正常的貼壁狀態(tài)，邊緣開始萎縮，上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑，晃動(dòng)細(xì)胞瓶會(huì)看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動(dòng)。隨著傳代次數(shù)增加，細(xì)胞萎縮的情況越來越---，直到zui終完全脫壁而死亡。
4、細(xì)胞長的---，致密的單層，狀態(tài)也很正常，但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變，做滴度檢測(cè)幾乎測(cè)不出抗原滴度。這種情況也許是因?yàn)檠逯泻信c接種的---有同源的特---抗體。比如血清中經(jīng)常會(huì)存在乙腦抗體，牛------抗體等，如果存在這些抗體，就會(huì)把接進(jìn)去的---給中和掉。如果抗體滴度---，---會(huì)被抗體完全中和，就沒有---顆粒在細(xì)胞中增殖，所以會(huì)檢測(cè)不到---滴度。這種情況給---企業(yè)造成的損失是相當(dāng)大的，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費(fèi)，浪費(fèi)人力、物力，尤其是時(shí)間上的浪費(fèi)，從培養(yǎng)細(xì)胞開始到接---，到收液至少需要一兩個(gè)月，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況，那么這一兩月時(shí)間就白白浪費(fèi)掉了，這也是牛血清給---企業(yè)造成的風(fēng)險(xiǎn)之一。
5、細(xì)胞生長的狀態(tài)一般，產(chǎn)毒少，毒價(jià)低。這種情況比較常見，細(xì)胞是---的載體，由于血清不好，導(dǎo)致細(xì)胞生長狀態(tài)不好，---就無法進(jìn)行正常的---。并非所有---都不能---，所以就造成---的效價(jià)不夠，可能造成不合格產(chǎn)品。
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