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一水檸檬酸發(fā)酵機(jī)理
1940年h.a.克雷伯斯提出三羧循環(huán)學(xué)說以來，一水檸檬酸的發(fā)酵機(jī)理逐漸被人們所認(rèn)識。已經(jīng)證明，糖質(zhì)原料生成一水檸檬酸的生化過程中，由糖變成酸的過程與酒精發(fā)酵相同，亦即通過e-m途徑二磷酸己糖途徑進(jìn)行酵解。然后酸進(jìn)一步氧化脫羧生成---輔酶a，---輔酶a和酸羧化所生成的草酰縮合成為一水檸檬酸并進(jìn)入三羧循環(huán)途徑。
一水檸檬酸是代謝過程中的中間產(chǎn)物。在發(fā)酵過程中，當(dāng)微生物體內(nèi)的烏頭酸水合酶和異一水檸檬酸脫氫酶活性很低、而一水檸檬酸合成酶活性-時(shí)，才有利于一水檸檬酸的大量積累。
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一水檸檬酸是---生產(chǎn)的重要原料，對要求十分嚴(yán)格。文獻(xiàn)n弛。采用火焰原子吸收法同時(shí)測定一水檸檬酸中微量的鉛、鐵和鈣。本法采用wyx一406型原子吸收光譜儀．相應(yīng)元素的空心陰極燈，燈電流：pbl．4ma，fe2．4ma，cal．4ma。光譜通帶0．2nm；燃助比1：4。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或標(biāo)準(zhǔn)加入法測定。
在測定中可采用直接法，即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸5．0000g于100ml燒杯中，加適量水溶解后移入100ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，分別與混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列同時(shí)測定。
采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸5．0000g三份于3個(gè)100ml燒杯中，加適量水溶解后移入100ml容量瓶中，分別加入一定量的鉛、鐵和鈣，然后加水定容，待測。
檸檬酸是有機(jī)酸，為證實(shí)溶液中有機(jī)質(zhì)對測定的影響，采用濕法灰化法．即準(zhǔn)確稱取一水檸檬酸2．5000g子100ml瓷坩堝中，加入5ml 2mol／l硝1酸，在電爐上緩慢加熱．待炭化完全后，移入550 ℃高溫爐中灰化。灰化后滴加數(shù)滴(1+1)硝1酸以溶解灰份，然后移入50ml容量瓶中，用水定容稀釋至刻度，同時(shí)作試劑空白試驗(yàn)。與混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列同時(shí)進(jìn)行測定。試驗(yàn)表明三種測定方法的結(jié)果一致，而直接法快速，經(jīng)濟(jì)。
干擾試驗(yàn)表明，試樣中氯離子，---根離子，草酸根離子和鉛、鐵、鈣等離子的含量均低于100pg／ml，均不干擾鉛、鐵、鈣的測定。
本法回收率：鉛101．9％～110．3%；鐵95．8％～99％；鈣96％～100％．相對標(biāo)準(zhǔn)偏差則為1．6％～10．2％。
為了消除共存元素對鈣測定的干擾，通常加入10％硝1酸---作釋放劑。在檸檬酸試樣加---鹽和不加---鹽的測定結(jié)果，未發(fā)現(xiàn)鈣的消光度有明顯變化，說明試樣中不含poi干擾組分。
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