分子生物學檢測服務
隨著生命科學和化學的不斷發展,人們對生物體的認知已經逐漸深入到微觀水平。從單個的生物體到qi官到組織到細胞,再從細胞結構到-和蛋白的分子水平,人們意識到可以通過檢測分子水平的線性結構如-序列,來橫向比較不同物種,同物種不同個體,同個體不同細胞或不同生理病理狀態的差異。這就為生物學和醫學的各個領域提供了技術平臺。分子生物學檢測技術是現代分子生物學與分子遺傳學取得進步的結晶,是在人們對基因的結構以及基因的表達和調控等生命本-題的認識日益加深的基礎上產生的。近年來,分子生物學檢測技術的方法學研究取得了進展,先后建立了各種分子生物學檢測技術。
聚合酶鏈式反應(pcr)
操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
1qpcr buffer
5 μl
dntp mix( 2mm )
4 μl
引物1(10pm)
μl 2
引物2 ( 10pm)
2μl
taq酶(2u/ul)
1 μl
dna模板( 50ng-1μg/μl )
1 μl
加ddh2o至
μl 50
視pcr儀有無熱蓋,---怎么做,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置pcr儀上執行擴增。-般:在93°c
預變性3-5min ,進入循環擴增階段: 93°c 40s***58°c 30s***72°c 60s ,循環30-35
次,后在72°c保溫7min。
3.結束反應,---多少錢, pcr產物放置于4°c待電泳檢測或-20°c長期保存。
4. pcr的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100ul進行抽提反應混合液,以
除去石蠟油;否則,吉林pcr,直接取5- 10μl電泳檢測。
單核苷酸多態性( snp )實驗
snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態性 ,是由于單個核苷酸改變而導
實驗方法原理:
snp (single nucleotide polymorphisn即單核苷酸多態性,是由于單個核苷酸改變而導