-效力-菌液制備
取大腸埃希菌、金黃色putao球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物用 ph7.0 無菌--蛋白胨緩沖液或 0.9%無菌-溶液制成 適宜濃度的菌懸液。取表 2 黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入 3~5ml 含 0.05%ml/ml聚山梨酯80 的 ph7.0 無菌--蛋白胨緩沖液或 0.9%無菌-溶液,將孢子洗脫。然后,采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi),用含 0.05%ml/ml聚山梨酯80 的 0.9%無菌-溶液制成適宜濃度的孢子懸液。
菌液制備后若在室溫下放置,應(yīng)在 2 小時內(nèi)使用;若保存在 2~8℃,可在24 小時內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在 2~8℃,在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。
1.血細(xì)胞計(jì)數(shù)法
將稀釋的菌液樣品滴在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)算4~5個中格的-數(shù),并求出每個小格所含-的平均數(shù),工作臺微生物檢測室,再以此為依據(jù),估算總菌數(shù)。
此法的缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌和活菌。
對壓在小方格界線上的-,應(yīng)當(dāng)取平均值計(jì)數(shù)。
此法可用于測定培養(yǎng)液中酵母jun種群數(shù)量的變化
2.稀釋涂布平板法
原理:每個活-在適宜的培養(yǎng)基和-的生長條件下可以通過生長形成菌落。培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。
這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目
統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,原因是當(dāng)兩個活多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落。因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。
土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含-、酵母、芽孢與孢子等的數(shù)量均可用此法測定。但不適于測定樣品中絲狀體微生物,例如放線jun或絲狀-或絲狀藍(lán)-等的營養(yǎng)體等。
此法若不培養(yǎng)成菌落,可通過將一定量的菌液均勻地涂布在玻片上的一定面積上,經(jīng)固定染色后在顯微鏡下計(jì)數(shù),這樣又稱涂片計(jì)數(shù)法。染色可用臺盼藍(lán),臺盼藍(lán)能使-染成藍(lán)色,可分別計(jì)數(shù)-和huo細(xì)胞。