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1.產(chǎn)品介紹
乳鐵蛋白是近年來(lái)---外開發(fā)研究速度---的一種營(yíng)養(yǎng)添加劑,由于其具有廣譜-、抗--、調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵平衡、調(diào)解-細(xì)胞的生成、抑制人體---細(xì)胞、同多種-及-制劑協(xié)同有效----等功效,使其產(chǎn)品在---外乳制品加工中的應(yīng)用范圍日益廣泛。
-親和柱能夠特-的純化樣品中的乳鐵蛋白,本產(chǎn)品采用了柱狀瓊脂糖凝膠作為固相載體,瓊脂糖凝膠與-偶聯(lián)形成免疫吸附劑,裝柱制成免疫親和柱,能夠特-的純化樣品中的乳鐵蛋白,樣品前處理后,通過(guò)免疫親和柱凈化,乳鐵蛋白特-吸附在親和柱上,用淋洗液將免疫親合柱上的雜質(zhì)除去,用洗脫液通過(guò)分離柱,將乳鐵蛋白親和柱-離下來(lái),---,將洗脫液注入hplc或lc-ms進(jìn)行測(cè)定。
2.用途
適用于乳、乳粉等食品中乳鐵蛋白含量測(cè)定;樣品中乳鐵蛋白的凈化,提取等。
3.產(chǎn)品性能
性能 指標(biāo)
基質(zhì) 瓊脂糖微球
配基 -
載量 ***3mg /支
規(guī)格 3ml/支
粒徑 45~165μm
上樣---流速 1-2滴/秒
洗脫---流速 1-2滴/秒
工作溫度 室溫22-25℃左右
儲(chǔ)存緩沖液 20%---
儲(chǔ)存溫度 4-8℃嚴(yán)禁0℃以下保存
有效期 12個(gè)月
4.操作流程
結(jié)合緩沖液:50 mm 磷酸鹽緩沖液、ph8.0左右
洗脫緩沖液:50 mm磷酸鹽緩沖液,2 m nacl,ph8.0 左右
1樣品處理:
注:適當(dāng)調(diào)節(jié)樣品稱取量,使樣品中乳鐵蛋白含量應(yīng)控制在3mg以內(nèi)。
乳粉:-稱取 2g樣品,置于玻璃燒杯中,加入已預(yù)熱至40 ℃左右不可超過(guò)50℃的結(jié)合緩沖液35 ml ,用玻璃棒攪拌使其溶解均勻。將其轉(zhuǎn)移至50 ml 容量瓶中,用少量的結(jié)合緩沖液分次洗滌燒杯和玻璃棒,洗滌液一并移入容量瓶中,用結(jié)合緩沖液定容至50ml,混勻,倒入50 ml離心管中,在4℃條件下離心5000r、10min,棄掉上層油脂,底層沉淀,取中間層或微纖維過(guò)濾方式去除油脂和雜質(zhì),準(zhǔn)確吸取10 ml作為樣品液。
奶液:稱取適量樣品以不超過(guò)3mg乳鐵蛋白載量為原則,例如:普通牛奶中乳鐵蛋白參考含量小于0.5mg/g,建議稱量10-20g、牛初乳中乳鐵蛋白參考含量1-2mg/g,建議稱量2-5g,置于50ml容量瓶中,用結(jié)合緩沖液定容至50ml,混勻,倒入50 ml離心管中,在4℃條件下離心5000r、10min,棄掉上層油脂,底層沉淀,取中間層或微纖維過(guò)濾方式去除油脂和雜質(zhì),準(zhǔn)確吸取10 ml作為樣品液。
2柱子預(yù)處理:取出-親和柱,恢復(fù)至室溫22-25℃,將上端塞子取出,打開下端堵頭,將柱內(nèi)保存液流掉---于凝膠上界面3-5mm處,加入總體積10ml的結(jié)合緩沖液平衡柱子柱子不要走干。
3加樣:加入處理好的樣品10ml,以流速為1-2滴/秒上樣,直至樣品全部通過(guò)親和柱至凝膠上界面柱子不要走干。
4淋洗:加入10ml結(jié)合緩沖液淋洗柱子,除去雜質(zhì),適當(dāng)給一些壓力,調(diào)節(jié)流速為1-2滴/秒,直至樣品全部通過(guò)-親和柱,并排干。
5洗脫:加入4ml洗脫緩沖液,調(diào)節(jié)流速為1-2秒每滴,緩慢洗脫并排干,收集全部洗脫液,以洗脫緩沖液定容至4ml,即為凈化后樣品。
6檢測(cè):凈化后樣品用質(zhì)譜,-液相、熒光等方法進(jìn)行檢測(cè)。
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