細(xì)胞名稱:
種屬來源:
組織來源:
特 征:
細(xì)胞形態(tài):
生長特性:
培 養(yǎng) 基:
生長條件:
傳代方法:
凍存條件:
支原體檢測:
安全等級:
應(yīng) 用:
str:
amelogenin: x
csf1po: 11,12
d13s317: 9,13
d16s539: 12,14
d5s818: 12,13
d7s820: 10
tho1: 9
tpox: 11
vwa: 15,17
同工酶:
ak-1, 1
es-d, 1
g6pd, b
glo-i, 2
me-2, 0
pgm1, 1
pgm3, 1
皮膚ai細(xì)胞株a-431源自一位85歲女性，是d.j.giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。 它在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的nih 瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下zhong liu，在普通成纖維細(xì)胞和瓊脂上形成---。 這是一個超三倍體人細(xì)胞株。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測。
1) 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或---污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
1復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1ml 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2細(xì)胞傳代：如果
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞---情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)---時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 t25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血 清和 dmso，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子等，---細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4.靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8ml 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯合度 80%左右時正常傳代。
5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6.建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 我司 技術(shù) 部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐�別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的------回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
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