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外周血單個核細胞peripheral blood mononuclear cell,pbmc,是指外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞lymphocyte、單核細胞monocyte、樹突狀細胞dc和其他少量細胞。pbmc可利用健康人或動物供體的外周血,通過ficoll密度梯度離心,磁珠分選等步驟獲得,主要包括淋巴細胞和單核細胞。
ficoll是蔗糖的多聚體,中性,平均分子量400,000,當密度為1.2g/ml,未超出正常生理性滲透壓,也---過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞,就可從外周血中分離到單個核細胞。
pbmc中大部分都是淋巴細胞,包括b細胞和t細胞,其中cd3 t細胞又占了淋巴細胞中絕大部分(45-70%)。這些t細胞都處于初始---狀態,即已經成熟了但沒有受到抗原---。 在正常人中,只有非常小的一部分初始t細胞會因抗原識別而被---。同樣的b細胞也都處于初始狀態。相對于淋巴細胞,單核細胞的比例在10-30%,收到---之后會發育成樹突狀細胞(dc)或巨噬細胞。干細胞的比例非常低,只有0.1-0.2%,因此很難從全血樣本中分離到。
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