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dna的粗提
2) 冷卻后加入等體積:易---24:1,輕柔顛倒混勻使乳化10min;
3) 7000g-8000g離心10min18-20℃;
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中;
5) 根據(jù)需要可用氯放:易---如上法重復(fù)抽提一次,吸取上清;
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀dna;
8) 在75%---中漂洗dna數(shù)分鐘以上,用tip頭吸干---;
9) 用1ml 75%---再漂洗一次;
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,不要過度干燥;
11) 用50μlte溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,dna粗提物可用于粗略pcr等。
利用高通量組織研磨儀對(duì)要進(jìn)行dna提取的植物樣品研磨的好處在于:研磨過程中,不會(huì)對(duì)植物組織造成破壞,可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨,封閉式的樣品管,避免樣品交叉污染。
2.無交叉污染,研磨罐在破碎過程中處于全封閉狀態(tài),實(shí)驗(yàn)室震動(dòng)球磨儀,可采用---離心管和珠子。樣品完整保留在罐內(nèi),避免樣品間的交叉污染以及外界污染。
3.操作簡(jiǎn)便,人性化操作界面觸摸屏,內(nèi)置程序控制器,可對(duì)研磨時(shí)間、轉(zhuǎn)子的振動(dòng)頻率等參數(shù)進(jìn)行設(shè)置。
4.重復(fù)性好,同一組織樣本設(shè)定相同程序,獲得相同的研磨效果。工作時(shí)間短,樣本溫度不會(huì)上升
5.無易損件設(shè)計(jì),電磁鎖定保護(hù)
6.不銹鋼內(nèi)腔,清潔消毒方便
低溫研磨樣品能夠有效抑制---降解、保留蛋白質(zhì)活性。
·分析藥的成分
藥的有效成分的異構(gòu)體之間常常存在重大區(qū)別。低溫研磨可預(yù)防分子因壓力和受熱而降解。
·減少樣品揮發(fā)
低溫研磨能---減少樣品的揮發(fā),更完整保留樣品成分含量
·研磨韌性/硬性樣品
對(duì)于高韌塑料、高強(qiáng)塑料、樹脂等難研磨樣品,低溫研磨可---提高研磨效果及效率