上海琛藝實業(yè)有限公司為您提供提供elisa試劑盒供應(yīng)商。 中文稱:人成纖維細胞長因子(fgf)elisa試劑盒 英文稱:rat folic acid,fa elisa kit 本試劑僅供研究使 目的:本試劑盒于測血清,血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠---(fa)的含量。 實驗原理:本試劑盒應(yīng)雙抗體夾心測標本中 大鼠---(fa)水平。化的 大鼠---(fa)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠---(fa),再與hrp標記的 大鼠---(fa)抗體結(jié)合,成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,上海琛藝實業(yè)有限公司,琛藝實業(yè),經(jīng)過---洗滌后加底物tmb顯色。tmb在hrp酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣中的 大鼠---(fa)呈正相關(guān)。酶標儀在450nm波長下測吸光度od值,通過標準曲線計算樣中 大鼠---(fa)濃度。 人成纖維細胞長因子(fgf)elisa試劑盒 樣本處理及要求: 1. 血清:室溫---自凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。 仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求擇edta或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀成,應(yīng)該再次離心。 3. 尿液:菌管收集,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份,菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份,pbsph7.2-7.4稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,提供elisa試劑盒供應(yīng)商,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀成,應(yīng)再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取量。加入量的pbs,ph7.4。液氮迅速冷凍保存?zhèn)洹吮救诨笕员3?-8℃的溫度。加入量的pbsph7.4,手或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細收集上清。分裝后份待檢測,其余冷凍備。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融. 7. 不能檢測含nan3的樣,因nan3抑制辣根---化物酶的hrp活性。 操作步驟: 1. 標準的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準孔10孔,在、孔中分別加標準100μl,后在、孔中加標準稀釋液50μl,混勻;后從孔、孔中各取100μl分別加到三孔和四孔,再在三、四孔分別加標準稀釋液50μl,混勻;后在三孔和四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到五、六孔中,再在五、六孔中分別加標準稀釋液50ul,混勻;混勻后從五、六孔中各取50μl分別加到七、八孔中,再在七、八孔中分別加標準稀釋液50μl,混勻后從七、八孔中分別取50μl加到九、十孔中,再在九十孔分別加標準稀釋液50μl,混勻后從九十孔中各取50μl棄掉。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔空白對照孔不加樣及酶標試劑,其余各步操作相同、待測樣孔。在酶標包被板上待測樣孔中先加樣稀釋液40μl,后再加待測樣10μl樣終稀釋度為5倍。加樣將樣加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將3048t的20倍倍濃縮洗滌液蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)此藍色立轉(zhuǎn)黃色。 11. 測:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度od值。 測應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)研發(fā)、產(chǎn)、經(jīng)營為體的化物程公司。公司酶科elisa試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,,羊,兔,植物,農(nóng)殘類,魚類等。具有完善的實驗技術(shù)開發(fā)平臺,成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團隊,可以有效的---公司產(chǎn)強的穩(wěn)性和高的準確性,同又具有競爭力的價格